CART细胞的抗肿瘤潜力

　　虽然FDA尚未批准获得性T细胞疗法，肿瘤免疫治疗正在取得突破性进展。华盛顿西雅图Fred Hutchinson癌症研究中心的Stanley Riddell博士最近在美国科学协会在华盛顿特区举行的年度会议上分享了他的研究团队在合成并评估嵌合抗原受体（CAR）T细胞方面的进展。

　　CAR T细胞治疗是指在患者的T细胞内插入一个合成的受体，然后识别和消灭表达特异性抗原的肿瘤。到目前为止，研究人员已经获得了显著的成功，尽管是在一项小的临床试验内。该研究中此疗法主要针对CD19抗原，它在所有B细胞表面上表达，包括像急性淋巴细胞白血病（ALL）和非霍奇金淋巴瘤B细胞恶性肿瘤（ NHL）等。Riddell报道，29例化疗后甚至在某些情况下，骨髓移植后复发的ALL患者中完全缓解率为93％。他还表明，在一例患者的肾脏以及其他患者的胃中，非霍奇金淋巴瘤肿瘤细胞被“CAR T细胞完全消灭了。”

　　这些数据也印证了其他研究CAR T细胞潜在疗效的结果，Riddell说：“我们的工作与其他研究不同的是，我们只合成在患者中最能增殖和维持的CAR T细胞。 T细胞不是一种单一的来源，具有不同特征，它们具有表型不同的亚型，并在宿主的免疫系统中发挥不同的属性。此外，接受 CAR T细胞治疗的患者往往已经接受过多种其他治疗方法，这类患者的T细胞的有效性往往很低”。因此选择最好的T细胞是关键，而为了他们的工作就是为了确保合成具有均一效力并可持续的CAR T细胞。

　　Riddell的研究小组还发现，将CAR-嵌合的天然和中央记忆T细胞结合时，能够协同淸除小鼠的肿瘤。他们目前正在患者体内分离出这些亚型来在临床上测试这种肿瘤杀伤的协同作用。研究人员还发现，通过选择特效性的高度增殖T细胞，则可以避免递增剂量。患者输注米粒大小的细胞沉淀后，可以在体内迅速扩增以对抗肿瘤负担。“制作这些颗粒仅需要短短几天时间，大大改变了这种疗法的可行性。” Riddell表示。

　　构建自杀基因的利弊

　　在这次会议上，意大利米兰圣拉斐尔科学研究所的Chiara Bonini博士报告了一种通过不同的方式编辑T细胞受体（TCR）基因来调整T细胞特异性的方法。“针对肿瘤抗原的特异性TCR比较罕见，但我们的小组已经设计了一种锌指核酸酶作为分子剪刀。我们可以剪断任何T细胞的内源性受体基因，并用一种肿瘤特异性TCR取代它。”

　　无论是哪种重新定向T细胞特异性的策略，这些经过修饰细胞发挥效应的同时也具有一定的毒副作用，危及患者生命的免疫副作用主要是细胞因子释放综合征。因此，目前的实验性疗法通常会设计一种“自杀开关”，以减轻严重的毒性反应。Bonini博士设计了一种T细胞共表达单纯疱疹病毒胸苷激酶自杀基因，如果需要的话，这些细胞可以通过给予抗病毒药物更昔洛韦被耗尽。同时，Riddell曾与德国慕尼黑技术学院的Dirk Busch博士设计了另一种“开关”，他们构建的T细胞共表达EGFR，可以通过给予西妥昔单抗清除。Busch博士说：“我们依靠的不是一种类型的自杀开关，我们应该设计一系列的自杀基因，在临床上需要防止或降低毒性的T细胞耗竭程度可能存在不同的情况。”

　　“你消除了治疗的同时，”凯瑟琳纪念斯隆癌症中心的细胞工程总监Michel Sadelain博士表示，自杀开关激活的另一面是，同时影响了CAR T细胞的疗效。他的研究小组正在通过构建CD19-CAR靶向性T细胞消除B细胞肿瘤。“我个人的看法是，这些开关是一种有价值的辅助，但如果过度依赖这些基因，那么你真的应该改变你的细胞设计了。”

　　将来的探索

　　由于目前构建的T细胞只能够识别单个抗原，是一种一维的有限的治疗方法，Sadelain等研究人员正在探索一些组合抗原的可能性。他的研究小组已经开发出一种可以识别含一对抗原-A和B肿瘤的T细胞，如果只有这些抗原只存在一个，那么此时的CAR T细胞处于亚激活状态。另一组研究人员先后建成了顺序启动的T细胞“电路”，一种识别抗原A的CAR T细胞继而激活靶向抗原B的CAR T细胞，只有在这两种抗原同时存在的情况下，T细胞才能攻击肿瘤。考虑到适合于靶向治疗的肿瘤特异性抗原的缺乏，这种策略的目的是扩大这一免疫治疗的适用性，尤其是在实体瘤中，并确保区别正常组织与肿瘤。

　　“总之，获得性T细胞的概念不仅仅是有关构建一种肿瘤杀伤物质，至少它不应该是，” Sadelain说。“我们所拥有的这种活性药物可以探索的领域还有很多，包括改变整个肿瘤的微环境。目前的治疗方法的覆盖面仍然有限，但是还有许多可以改进的空间。”